FDTE/VTR Importer Une Valeur Toxicologique de Référence (VTR) est un indice qui est établi à partir de la relation entre une dose externe d'exposition à une substance et la survenue d'un effet néfaste. Les valeurs toxicologiques de référence proviennent de différents organismes.

PRINCIPALES ÉTUDES
Le paragraphe rapporte les études sur lesquelles s’appuient les Valeurs Toxicologiques de Référence (VTR).

Effets à seuil - Exposition par inhalation :
Pour les études expérimentales :
CIIT, 1981
Espèce étudiée : Rats F-344 et souris B6C3F1.
Sexe et nombre d’animaux par lot : 117 à 120/sexe/espèce/concentration.
Voie d’exposition : Inhalation.
Substance - forme chimique : chlorure de méthyle pur (pureté 99,97 %)
Temps et fréquence d’exposition : 6 h/j, 5 j/semaine pendant 24 mois.
Doses d’exposition / formes chimiques : 50 – 225 – 1 000 ppm (103 – 465 – 2 065 mg.m^-3) à chlorure de méthyle pur ce qui correspond à des niveaux d’exposition ajustés de 8,9 – 40,2 – 178,6 ppm (18,4 – 83,0 – 368,8 mg.m^-3).
Lot témoin : oui.
Protocole : Il n’est pas précisé mais semble suivre celui d’une étude d’exposition chronique de 2 ans.
Résultats / effets observés :
Chez les souris
La mortalité est augmentée de manière statistiquement significative par rapport aux témoins chez les femelles (à partir de 10 mois) à la concentration de 1 000 ppm mais pas aux autres concentrations. Des signes suggérant une toxicité du système nerveux central sont observés chez les souris uniquement à la concentration la plus élevée : tremblements et paralysie. Des altérations neurofonctionnelles (« clutch response ») sont retrouvées chez à peu près l’ensemble des souris des deux sexes après 18 à 22 mois d’exposition. Ces observations sont associées à des lésions du cervelet (dégénérescences et atrophie la couche granulaire) qui apparaissent à 1 000 ppm dès 18 mois. Ces effets et altérations ne sont pas retrouvés aux autres concentrations.
A la fin de l’exposition (22 ou 24 mois), il y a une différence d’incidence de gonflement axonal ou de dégénérescence dans des nerfs périphériques entre lots exposés et témoins. Ces effets sont plus marqués aux deux concentrations les plus basses.
Les lésions hépatocellulaires (vacuolisation, caryomégalie, cytomégalie, cellules multinuclées et dégénérescences) sont observées à partir de 6 mois chez les mâles exposés à 1 000 ppm. Une augmentation des niveaux d’ALAT est mesurée à 50 et 225 ppm chez les souris mâles et les femelles. La fréquence des lésions hépatiques augmente à 12 et 18 mois d’exposition majoritairement chez les mâles victimes d’une mort de cause non expliquée.
Une hyperplasie et caryomégalie de l’épithélium des tubules rénaux surviennent dès 12 mois chez les mâles exposés à 1 000 ppm. Une augmentation de l’incidence et de la sévérité de ces effets rénaux est rapportée à 21 mois.
Une dégénérescence et une atrophie statistiquement significatives des tubules séminifères sont observées chez les mâles exposés à 1 000 ppm.
Une atrophie splénique et une déplétion lymphocytaire sont observées à partir de 6 mois d’exposition à 1 000 ppm.
Chez les rats
Il n’a pas été observé de mortalité liée à l’exposition.
Les seules lésions histologiques qui ont été observées concernent les testicules : dégénérescence diffuse et atrophie bilatérale des tubules séminifères à 1 000 ppm.
A 18 mois, une hyperplasie interstitielle liée à l’âge et/ou des adénomes testiculaires ont été observés chez les lots témoins et exposés à 225 ppm. Ces lésions présentent une augmentation de l’incidence concentration dépendante.
Dose critique :
Souris : NOAEL = 225 ppm et LOAEL = 1 000 ppm pour les effets neurotoxiques, hépatotoxiques, rénaux et testiculaires pour expositions chroniques et LOAEC = 50 ppm pour les effets hépatiques après 6 mois d’exposition.
Rat : NOAEL = 225 ppm et LOAEL = 1 000 ppm pour les effets testiculaires dégénérescence et atrophie des tubules.
Qualité de l’étude : 2, étude présentant des limitations de qualité. Le rapport n’est pas publié mais peut être consulté uniquement sous forme de microfiches. L’analyse de l’étude menée par l’US EPA fait état d’erreurs concernant le sexage des animaux (quelques gestations en cours d’étude). Les investigateurs considèrent le problème comme sérieux mais n’altérant pas la validité de l’interprétation des résultats. Ces conclusions semblent raisonnables compte tenu des types d’effets et des niveaux auxquels ils surviennent et sont confirmées par plusieurs études de durées plus courtes.



LANDRY et al., 1985
L’étude de Landry et al. 1983 n’est pas publiée, il s’agit du rapport détaillé de l’étude.
Espèce étudiée : souris C57BL/6.
Sexe et nombre d’animaux par lot : femelles 12/lot pour les tests neurofonctionnels et 5/lot pour la nécropsie.
Voie d’exposition : Inhalation.
Substance - forme chimique : chlorure de méthyle
Temps et fréquence d’exposition : deux types d’exposition : continue  22 h/j et intermittente : 5,5 h/j pendant 11 jours.
Doses d’exposition / formes chimiques :
continue : 15 – 50 – 100 – 150 – 200 – 400 ppm (30 – 102 – 204 - 306 – 408 – 816 mg.m^-3) et
intermittente : 150 - 400 – 800 – 1 600 – 2 400 ppm (306 – 408 – 1 632 – 3 264 – 4 896 mg.m^-3)
Lot témoin : oui.
Protocole : Deux séries d’expositions ont été réalisées. Au cours de la première série, les souris ont été exposées à 0 - 100 – 200 - 400 ppm de manière continue et 0 – 400 – 800 – 1 600 ppm de manière intermittente. Au cours de la seconde série, les souris ont été exposées à 0 – 15 – 50 – 150 ppm de manière continue et 0 – 150 – 2 400 ppm de manière intermittente. Les animaux sont observés deux fois par jour.
Des sous-groupes de 5 souris exposés à 150 et 400 ppm de manière continue ou à 2 400 ppm de manière intermittente ont été sacrifiés à des durées d’exposition intermédiaires. Les souris ont été nécropsiées 24 h après la fin de l’exposition.
Un test de motricité (rotarod)[1] a été réalisé 2 h à 2 h30 après exposition aux jours 4, 8 et 11.
Résultats / effets observés : Aucun effet n’est observé chez les souris pour une exposition continue à 50 ppm ou intermittente à 150 ppm.
Les lésions du cervelet apparaissent pour une exposition continue à 100 ppm, la sévérité de ces lésions est dose-dépendante. A 100 ppm, ces lésions correspondent à une dégénérescence des cellules granuleuses caractérisée par une pycnose nucléaire[2] et une carryorrhexis[3]. A 150 ppm, aucune lésion histologique n’est retrouvée à 2 jours d’exposition mais à 4 jours, il est observé une vacuolisation modérée intracellulaire et extracellulaire des cellules du cervelet (purkinje et/ou cellules de la couche granulaire) et dans la substance blanche. Cette vacuolisation est transitoire et n’est pas retrouvée à 6 jours d’exposition et au-delà. Ces effets sont plus prononcés à 400 ppm. Ces effets histologiques sont accompagnés par une diminution de la performance au test de neurofonctionnel rotarod à partir de 150 ppm.
Pour une exposition intermittente, les lésions histologiques surviennent à partir de 400 ppm, elles demeurent légères jusqu’à 1 600 ppm et deviennent légères à modérées à 2 400 ppm ; elles sont également associées à des diminutions du test de performance à partir de 800 ppm.
L’exposition continue induit des lésions du cervelet correspondant à une dégénérescence des cellules de la couche granuleuse du cervelet avec des effets moins important sur les autres tissus que ceux observés avec les expositions intermittentes. Des lésions hépatiques correspondant à une diminution de la taille des hépatocytes (apparemment due à une déplétion du glycogène) surviennent à 100 ppm pour une exposition continue pouvant évoluer en une nécrose localisée pour les niveaux d’exposition les plus élevés. Les effets hépatiques sont également observés lors d’une exposition intermittente, ils surviennent pour des expositions de 400 à 2 400 ppm et sont également attribués à une déplétion de glycogène mais sans dégénérescence hépatique ou nécrose. Des lésions rénales ne sont observées que lors d’une exposition intermittente à la dose la plus élevée : très légère dégénérescence multifocale et régénération des tubules.
A 2 400 ppm, les souris présentent des lésions rénales et hépatiques en plus des effets sur le cervelet. Ces souris présentent également une hémoglobinurie qui serait la conséquence d’une hémolyse intravasculaire.
Dose critique :
NOAEL = 50 ppm, LOAEL = 100 ppm pour les effets neurotoxiques pour une exposition continue.
NOAEL = 150 ppm, LOAEL = 400 ppm pour les effets neurotoxiques pour une exposition intermittente.
Qualité de l’étude : 2. Etude de bonne qualité, bien documentée. Une analyse de la concentration d’exposition et une analyse statistique ont été menées, la dose interne n’a cependant pas été mesurée.

FDTE/VTR Importer Effets à seuil - Exposition aiguë par inhalation :
L’ATSDR propose un MRL de 1 020 µg.m^-3 (0,5 ppm) pour une exposition aiguë par inhalation au chlorométhane (ATSDR, 1998).
Cette valeur est établie à partir de l’étude expérimentale chez la souris de Landry et al., 1985. Une NOAEC de 50 ppm a été déterminée en l’absence d’effet sur la coordination motrice ou de dommage au niveau des cellules granulaires du cervelet.
Aucun ajustement sur le temps n’a été pratiqué, car il a été montré que le chlorométhane est aisément et rapidement absorbé au niveau des poumons aussi bien chez l’homme que chez l’animal.
Une valeur équivalente chez l’homme (NOAEC_HEC) a été calculée selon les recommandations de l’US EPA (1994). Le chlorométhane est un gaz de catégorie 2 mais la formule pour les effets extra-respiratoires étant en révision, l’équation qui est recommandée est celle des gaz de catégorie 3 :
NOAEC_HEC = NOAEL_ADJ x (Hb/g)_A / (Hb/g)_H
Où :NOAEC_{HEC =} valeur équivalente chez l’homme
NOAEL_ADJ=valeur ajustée pour la durée d’exposition
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’animal
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’homme
Le rapport des coefficients de partage prend la valeur de 1 s’il n’est pas connu.
NOAEC_HEC = 50 ppm x1 = 50 ppm
Facteurs d’incertitude : Un facteur d’incertitude 100 a été appliqué correspondant à un facteur 10 pour tenir compte de l’extrapolation de l’animal à l’homme et d’un facteur 10 pour les variations au sein de la population humaine.
Calcul : 50 ppm x 1/100 = 0,5 ppm soit 1,02 mg.m^-3 ou 1 020 µg.m^-3
Indice de confiance : Cet organisme ne détermine pas d’indice de confiance.

Effets à seuil - Exposition sub-chronique par inhalation :
L’ATSDR propose un MRL de 408 µg.m^-3 (0,2 ppm) pour une exposition subchronique par inhalation au chlorométhane (ATSDR, 1998).
Cette valeur est établie à partir de l’étude expérimentale chez la souris de CIIT, 1981. Une LOAEC de 51 ppm a été déterminée pour les effets hépatiques : augmentation des niveaux d’ALAT.
Aucun ajustement sur le temps n’a été pratiqué, car il a été montré que le chlorométhane est aisément et rapidement absorbé au niveau des poumons aussi bien chez l’homme que chez l’animal.
Une valeur équivalente chez l’homme (LOAEC_HEC) a été calculée selon les recommandations de l’US EPA (1994). Le chlorométhane est un gaz de catégorie 2 mais la formule pour les effets extra-respiratoires étant en révision, l’équation qui est recommandée est celle des gaz de catégorie 3 :
LOAEC_HEC = LOAEL_ADJ x (Hb/g)_A/(Hb/g)_H
Où : LOAEC_{HEC =} valeur équivalente chez l’homme
LOAEL_ADJ = valeur ajustée pour la durée d’exposition
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’animal
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’homme
Le rapport des coefficients de partage prend la valeur de 1 s’il n’est pas connu.
LOAEC_HEC = 51 ppm x1 = 51 ppm
Facteurs d’incertitude : Un facteur d’incertitude 300 a été appliqué correspondant à un facteur 10 pour tenir compte de l’extrapolation de l’animal à l’homme, d’un facteur 10 pour les variations au sein de la population humaine et un facteur 3 pour l’utilisation d’une LOAEC.
Calcul : 51 ppm x 1/300 = 0,17 ppm arrondi à 0,2 ppm soit 408 µg.m^-3
Indice de confiance : Cet organisme ne détermine pas d’indice de confiance.

L’OMS CICAD propose une valeur de 18 µg.m^-3 (0,009 ppm) pour une exposition chronique par inhalation au chlorométhane (OMS CICAD, 2000).
Cette valeur est établie à partir de l’étude expérimentale chez la souris de CIIT, 1981. Une LOAEC de 50 ppm (103 mg.m^-3) a été déterminée pour les effets neurologiques : lésions histologiques des nerfs issus de la moelle épinière.
Un ajustement a été réalisé pour passer d’une exposition discontinue à continue :
NOAELADJ = NOAEL x 6 h/24 h x 5 j/7 j = 18,39 mg.m^-3
Facteurs d’incertitude : Un facteur d’incertitude 1 000 a été appliqué correspondant à un facteur 10 pour tenir compte de l’extrapolation de l’animal à l’homme, d’un facteur 10 pour les variations au sein de la population humaine et un facteur 10 pour l’utilisation d’un LOAEL et la faiblesse de la base de données.
Calcul : 18,39 mg.m^-3 x 1/1 000 = 0,018 mg.m^-3 soit 18 µg.m^-3
Indice de confiance : Cet organisme ne détermine pas d’indice de confiance.

FDTE/VTR Importer Effets à seuil - Exposition chronique par inhalation :
L’US EPA propose une RfD de 90 µg.m^-3 pour une exposition chronique par inhalation au chlorométhane (US EPA, 2001).
L’US EPA considère que les dysfonctionnements du système nerveux central sont les effets critiques du chlorométhane. Il indique qu’il existe une étude chronique mais qu’elle ne répond pas aux critères retenus par l’US EPA notamment en raison de plusieurs erreurs de procédures. Aussi, une étude répondant aux critères de qualité mais d’une durée d’exposition plus courte sera retenue
Cette valeur est établie à partir des études expérimentales chez la souris femelle de Landry et al., 1983, 1985. Une NOAEC de 50 ppm (103,2 mg.m^-3) et une LOAEC de 100 ppm (206,4 mg.m^-3) ont été déterminés pour la survenue de lésions du cervelet.
Un ajustement a été réalisé pour passer d’une exposition discontinue à continue :
NOAEC_ADJ = NOAEC x 22 h/24 h x 7 j/7 j = 94,6 mg.m^-3
Une valeur équivalente chez l’homme (NOAEC_HEC) a été calculée selon les recommandations de l’US EPA (1994). Le chlorométhane est un gaz de catégorie 2 :
NOAEC_HEC = NOAEC_ADJ x (Hb/g)_A/(Hb/g)_H
Où : NOAEC_{HEC =} valeur équivalente chez l’homme
NOAEC_ADJ = valeur ajustée pour la durée d’exposition
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’animal
(Hb/g)_A = coefficient de partage air sang chez l’homme
Le rapport des coefficients de partage a été estimé à environ 1.
NOAEC_HEC = 94,6 mg.m^-3 x1 = 94,6 mg.m^-3
Facteurs d’incertitude : Un facteur d’incertitude 1 000 a été appliqué correspondant à un facteur 3 pour tenir compte de l’extrapolation de l’animal à l’homme, d’un facteur 10 pour les variations au sein de la population humaine, un facteur 10 pour l’utilisation d’une exposition de 11 jours et un facteur 3 en l’absence de données histopathologiques du cerveau chez les souris de la génération F1.
Calcul : 94,6 mg.m^-3 x 1/1 000 = 0,0946 mg.m^-3 soit 94,6 µg.m^-3 arrondi à 90 µg.m^-3
Indice de confiance : L’US EPA accorde un indice de confiance élevé dans l’étude retenue, moyen dans la base de données et élevé dans la valeur élaborée.



L’ATSDR propose un MRL de 102 µg.m-3 (0,05 ppm) pour une exposition chronique par inhalation au chlorométhane (ATSDR, 1998).
Cette valeur est établie à partir de l’étude expérimentale chez la souris de CIIT, 1981. Une LOAEC de 51 ppm a été déterminée pour les effets neurologiques : gonflement axonal et une dégénérescence des axones de nerfs périphériques.
Aucun ajustement sur le temps n’a été pratiqué, car il a été montré que le chlorométhane est aisément et rapidement absorbé au niveau des poumons aussi bien chez l’homme que chez l’animal.
Une valeur équivalente chez l’homme (LOAECHEC) a été calculée selon les recommandations de l’US EPA (1994). Le chlorométhane est un gaz de catégorie 2 mais la formule pour les effets extra-repiratoire étant en révision, l’équation qui est recommandée est celle des gaz de catégorie 3 :
LOAECHEC = LOAELADJ x( (Hb/g)A /(Hb/g)H )
Où :LOAECHEC = valeur équivalente chez l’homme
LOAECADJ = valeur ajustée pour la durée d’exposition
(Hb/g)A = coefficient de partage air sang chez l’animal
(Hb/g)A = coefficient de partage air sang chez l’homme
Le rapport des coefficients de partage prend la valeur de 1 s’il n’est pas connu.
LOAECHEC = 51 ppm x1 = 51 ppm
Facteurs d’incertitude : Un facteur d’incertitude 1 000 a été appliqué correspondant à un facteur 10 pour tenir compte de l’extrapolation de l’animal à l’homme, d’un facteur 10 pour les variations au sein de la population humaine et un facteur 10 pour l’utilisation d’une LOAEC.
Calcul : 51 ppm x 1/1 000 = 0,051 ppm soit 102 µg.m-3
Indice de confiance : Cet organisme ne détermine pas d’indice de confiance.